4.5 Medición del
consumo de oxígeno
Una de las metodologías posibles para
determinar la respiración celular o mitocondrial es cuantificar el consumo de
oxígeno en preparados de células o mitocondrias. Esta cuantificación se puede
realizar mediante diferentes técnicas; una de las más sencillas es el electrodo
un oxígeno.
El electrodo de oxígeno comprende un
cátodo de platino central (B) unido a una resina y un ánodo de plata (C)
concéntrico unido por un puente
electrolítico y conectados al módulo control.
La cámara del electrodo es preparada por
aplicación de un espaciador de papel muy fino y una fina membrana
de poli-tetra-fluor-etileno (P.T.F.E.)
que es cuidadosamente fijada a la placa base donde se encuentran los electrodos
por un anillo-O. En la presencia de
oxígeno una pequeña corriente fluye a través de los electrodos que es
proporcional a
la concentración de oxígeno en la
muestra. Esta señal es digitalizada por la unidad de control y presentada
directamente.
Estos electrodos pueden ser
acondicionados para medidas en fase líquida o en fase gaseosa; aquí vamos a medir en fase líquida.
Todas las unidades del electrodo deben
mantenerse a temperatura constante durante las determinaciones. Esteefecto se consigue por circulación de
agua a la temperatura deseada alrededor de la cámara y controlando la
temperatura de los componentes de la muestra.
Este
control es importante por dos razones:
1º.- El electrodo es sensible a la
temperatura.
2º.- El contenido en oxígeno de las
muestras acuosas saturadas de aire cambia con la temperatura.
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